실험레포트 제한효소에 의한 DNA 절단 레포트입니다

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[실험레포트] 제한효소에 의한 DNA 절단 레포트입니다..hwp

본문 Ⅰ. Introduction 1. 실험 목적 시험관 내에서 (in vitro) 유전자 조작을 행할 때 쓰는 가장 기본적인 도구인 제한효소 (restriction enzyme)와 제한효소의 제한기작을 알아보고 플라스미드를 제한 절편들로 잘라 다시 맞추는 과정을 수행한다. 2. 실험 원리 (1) 제한 효소 제한효소란 DNA 분자의 특정 염기서열을 인지하여 이중가닥 DNA를 절단하는 균주 특이성을 갖는 endonuclease이다. 이것의 원래 기능은 세포 내로 침입해 오는 virus나 외래 DNA를 절단, 제거함으로써 그것이 복제되는 것을 막기 위한 박테리아의 자기방어 기구라 할 수 있으며, 자신의 DNA는 methylation시켜 외부의 DNA와 구분하여 보호한다. 제한효소는 크게 Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ군으로 분류되며 우리가 흔히 쓰고 있는 것들은 회문구조를 가진 짧은 염기쌍(4 - 6개가 가장 흔함)을 인식하는 Ⅱ군에 속하는 효소이다. 제한효소는 세균의 세포로부터 분리하여 실험실에서 유전자를 포함하고 있는 DNA 조각을 조작하는 데 사용할 수 있다. 이 때문에 제한효소는 DNA 재조합 기술에서 필수적인 도구로 사용된다. 제한효소는 각기 알맞은 반응 조건을 가지며 반응 완충액 (reaction buffer)의 경우 염의 농도에 따라 low, medium, high salt buffer로 나누어진다. 이외에도 pH, 반응 온도, DNA와 효소의 양 등이 변수로 작용한다. 제한효소는 뉴클레오티드 염기들(이중나선의 DNA 분자를 이루는 4가지 기본 단위인 아데닌시토신티민구아닌)의 짧은 특정 배열을 인식한다. 이러한 부위들은 인식 배열(recognition sequence)이라 부르며, DNA 전체에 무작위적으로 분포하고 있다. 세균의 종류에 따라 제한효소가 인식할 수 있는 뉴클레오티드의 배열이 모두 다른데, 몇 가지 주요 제한효소의 인식 부위와 제한 조건들은 다음과 같다. 제 한 효 소 제 한 부 위 염 농 도 (NaCl) 반 응 온 도 EcoRI 하고 싶은 말 좀 더 업그레이드하여 자료를 보완하여, 과제물을 꼼꼼하게 정성을 들어 작성했습니다. 위 자료 요약정리 잘되어 있으니 잘 참고하시어 학업에 나날이 발전이 있기를 기원합니다 ^^ 구입자 분의 앞날에 항상 무궁한 발전과 행복과 행운이 깃들기를 홧팅 키워드 제한효소, 효소, 반응, 가지, 실험, 특정